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2-21
細(xì)胞株,對(duì)于不熟悉它的人來(lái)說(shuō)沒(méi)什么,但了解它的人就知道它的作用。實(shí)驗(yàn)中常用的一個(gè)細(xì)胞株,在生物制藥中使用也非常廣泛。細(xì)胞株培養(yǎng)條件簡(jiǎn)單,貼壁強(qiáng)度適中,比較容易轉(zhuǎn)染,很適合用它來(lái)研究一般哺乳動(dòng)物基因的功能。通過(guò)選擇法或克隆形成法從原代培養(yǎng)物或細(xì)胞系中獲得具有特殊性質(zhì)或標(biāo)志物的培養(yǎng)物稱(chēng)為細(xì)胞株(CellStrain),也就是說(shuō),細(xì)胞株是用單細(xì)胞分離培養(yǎng)或通過(guò)篩選的方法,由單細(xì)胞增殖形成的細(xì)胞群。它的使用要格外小心,主要還是用于實(shí)驗(yàn)室和生物學(xué)中。
2-19
PCR儀,中文是聚合酶鏈?zhǔn)椒磻?yīng),其實(shí)是一種DNA的快速擴(kuò)增技術(shù),其擴(kuò)增效率之高就象核裂變的“鏈?zhǔn)椒磻?yīng)”那樣。PCR技術(shù)有以下幾個(gè)特點(diǎn):一是被擴(kuò)增的DNA所需量極小,理論上講一個(gè)分子就可以用于擴(kuò)增了;二是擴(kuò)增效率高,目的基因的量成指數(shù)形式擴(kuò)增,幾個(gè)小時(shí)就擴(kuò)增1000萬(wàn)倍以上?,F(xiàn)在PCR技術(shù)已經(jīng)被廣泛地應(yīng)用于生命科學(xué)研究、食品衛(wèi)生、醫(yī)療、法醫(yī)及環(huán)境監(jiān)測(cè)等諸多方面。
2-4
我們知道PCR儀有普通PCR儀和實(shí)時(shí)熒光定量PCR儀,還有種梯度PCR儀。梯度PCR儀把一次性PCR擴(kuò)增可以設(shè)置一系列不同的退火溫度條件,溫度梯度,通常有12種溫度梯度,這樣的儀器就叫梯度PCR儀。因?yàn)楸粩U(kuò)增的不同DNA片段,其zui適退火溫度事不同,通過(guò)設(shè)置一系列的梯度退火溫度進(jìn)行擴(kuò)增,從而一次性PCR擴(kuò)增,就可以篩選出表達(dá)量高的zui適退火溫度,進(jìn)行有效的擴(kuò)增。主要用于研究未知DNA退火溫度的擴(kuò)增,這樣節(jié)約成本的同時(shí)也節(jié)約了時(shí)間。主要用于科研,教學(xué)機(jī)構(gòu)。梯度PCR儀,在不...
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除了有普通的PCR儀外,還有種實(shí)時(shí)熒光定量PCR儀。在普通PCR儀的基礎(chǔ)上增加一個(gè)熒光信號(hào)采集系統(tǒng)和計(jì)算機(jī)分析處理系統(tǒng),就成了熒光定量PCR儀。其PCR擴(kuò)增原理和普通PCR儀擴(kuò)增原理相同,只是PCR擴(kuò)增時(shí)加入的引物是利用同位素、熒光素等進(jìn)行標(biāo)記,使用引物和熒光探針同時(shí)與模板特異性結(jié)合擴(kuò)增。擴(kuò)增的結(jié)果通過(guò)熒光信號(hào)采集系統(tǒng)實(shí)時(shí)采集信號(hào)連接輸送到計(jì)算機(jī)分析處理系統(tǒng)得出量化的實(shí)時(shí)結(jié)果輸出。這個(gè)PCR儀叫做實(shí)時(shí)熒光定量PCR儀。熒光定量PCR儀有單通道,雙通道,和多通道。當(dāng)只用一種熒光...
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PCR儀利用升溫使DNA變性,用限制性?xún)?nèi)切酶使DNA雙鏈解鏈,在聚合酶的作用下使單鏈復(fù)制成雙鏈,進(jìn)而達(dá)到基因復(fù)制的目的。PCR儀可以分為普通PCR儀,梯度PCR儀,原位PCR,實(shí)時(shí)熒光定量PCR儀等幾類(lèi)。普通PCR儀一般把一次PCR擴(kuò)增只能運(yùn)行一個(gè)特定退火溫度的PCR儀,稱(chēng)之為普通PCR儀。如果要用它做不同的退火溫度則需要多次運(yùn)行。主要是用作簡(jiǎn)單的,對(duì)目的基因退火溫度的擴(kuò)增。它主要應(yīng)用于科研、教學(xué)、臨床醫(yī)學(xué)、檢驗(yàn)、檢疫等。
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PCR儀是什么呢?它是聚合酶鏈反應(yīng)技術(shù),指利用耐熱DNA聚合酶的反復(fù)作用,通過(guò)變形-延伸-復(fù)性的尋壞操作,在體外迅速將DNA模板擴(kuò)增數(shù)百萬(wàn)倍的一種操作技術(shù)。PCR就是利用DNA聚合酶對(duì)特定基因做體外或試管內(nèi)InVitro的大量合成,基本上它是利用DNA聚合酶進(jìn)行專(zhuān)一性的連鎖復(fù)制。目前常用的技術(shù),可以將一段基因復(fù)制為原來(lái)的一百億至一千億倍。根據(jù)DNA擴(kuò)增的目的和檢測(cè)的標(biāo)準(zhǔn),可以將PCR儀分為普通PCR儀,梯度PCR儀,原位PCR儀,實(shí)時(shí)熒光定量PCR儀四類(lèi)。這就是PCR儀。
1-21
酶標(biāo)儀實(shí)際上就是一臺(tái)變相的光電比色計(jì)或分光光度計(jì)。酶標(biāo)儀是采用手工移動(dòng)微孔板進(jìn)行檢測(cè),因此省去了X,Y方向的機(jī)械驅(qū)動(dòng)機(jī)構(gòu)和控制電路,從而使儀器更小巧,結(jié)構(gòu)也更簡(jiǎn)單.微孔板是一種經(jīng)事先包理于放置待測(cè)樣本的透明塑料板,板上有多排大小均勻一致的小孔,孔內(nèi)都包埋著相應(yīng)的抗原或抗體,微孔板上每個(gè)小孔可盛放零點(diǎn)幾毫升的溶液.其常見(jiàn)規(guī)格有24孔板,48孔板,96孔板等多種,不同的儀器選用不同規(guī)格的孔板,對(duì)其可進(jìn)行一孔一孔地檢測(cè)或一排一排地檢測(cè)。這就是酶標(biāo)儀的構(gòu)成。
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