ELISA試劑盒的溫育常選用的溫度有43℃、37℃、室溫文4℃等。37℃是試驗室中常用的保溫溫度,也是大多數(shù)抗原抗體結(jié)合的適宜溫度。在樹立ELISA方法作反響動力學研究時,試驗標明,兩次抗原抗體反響一般在37℃經(jīng)1~2小時,產(chǎn)品的生成可達高峰。為加快反響,可進步反響的溫度,有些試驗在43℃進行,但不宜選用更高的溫度??乖贵w反響4℃更為*,在放射免疫測定中多使反響在冰箱中過夜,以構(gòu)成較多的沉淀。但因所需時刻太長,在ELISA試劑盒中一般不予選用。
ELISA試劑盒的保溫方法除有的ELISA儀器附有特制的電熱塊外,一般均選用水浴,可將ELISA試劑盒板置于水浴箱中,ELISA板底應貼著水面,使溫度敏捷平衡。為避免蒸發(fā),板上應加蓋,也可用塑料貼封紙或保鮮膜覆蓋板孔,此刻可讓反響板漂浮在水面上。若用保溫箱,ELISA試劑盒應放在濕盒內(nèi),濕盒要選用傳熱性杰出的資料如金屬等,在盒底墊濕的紗布,然后將ELISA板放在濕紗布上。濕盒應先放在保溫箱中預溫至規(guī)則的溫度,特別是在氣溫較低的時候更應如此。無論是水浴仍是濕盒溫育,反響板均不宜疊放,以確保各板的溫度都能敏捷平衡。室溫溫育的反響,操作時的室溫應嚴格約束在規(guī)則的范圍內(nèi),規(guī)范室溫溫度是指20~25℃,但具體操作時可根據(jù)說明書的要求操控溫育。室溫溫育時,ELISA試劑盒只需平置于操作臺上即可。應留意溫育的溫度和時刻應按規(guī)則力求。為確保這一點,一個人操作時,一次不宜多于兩塊板一起測定。