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神經(jīng)肽Y(NPY)ELISA 試劑盒
血清中針對(duì)某些抗原的特異性IgM常和特異性IgG同時(shí)存在,后者會(huì)干擾IgM抗體的測(cè)定。因此測(cè)定IgM抗體多用捕獲法,先將所有血清IgM(包括異性IgM和非特異性IgM)固定在固相上,在去除IgG后再測(cè)定特異性IgM。操作步驟如下:
⑴將抗人IgM抗體連接在固相載體上,形成固相抗人IgM。洗滌。
⑵加入稀釋的血清標(biāo)本:保溫反應(yīng)后血清中的IgM抗體被固相抗體捕獲。洗滌除去其他免疫球蛋白和血清中的雜質(zhì)成分。
⑶加入特異性抗原試劑:它只與固相上的特異性IgM結(jié)合。洗滌。
⑷加入針對(duì)特異性的酶標(biāo)抗體:使之與結(jié)合在固相上的抗原反應(yīng)結(jié)合。洗滌。
⑸加底物顯色:如有顏色顯示,則表示血清標(biāo)本中的特異性IgM抗體存在,是為陽性反應(yīng)。
神經(jīng)肽Y(NPY)ELISA 試劑盒
親和素是一種糖蛋白,一分子親和素可以與四個(gè)生物素小分子發(fā)生專一親和作用,類似抗原與抗體親和。它們之間的作用力是目前已知強(qiáng)的非共價(jià)作用。80年代后,隨著生物素-親合素系統(tǒng)(BAS)作用被發(fā)現(xiàn),這一親和作用被結(jié)合應(yīng)用到ELISA技術(shù)上,大大提高了后者反應(yīng)的靈敏性與專一性。生物素很易與蛋白質(zhì)(如抗體等)以共價(jià)鍵結(jié)合。這樣,結(jié)合了酶的親和素分子與結(jié)合有特異性抗體的生物素分子產(chǎn)生反應(yīng),既起到了多級(jí)放大作用,又由于酶在遇到相應(yīng)底物時(shí)的催化作用而呈色,達(dá)到檢測(cè)未知抗原(或抗體)分子的目的。
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