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簡(jiǎn)要描述:細(xì)胞色素C(Cyt-C)ELISA 試劑盒 Cytochrome C Assay Kit!本公司長(zhǎng)期經(jīng)營(yíng)代理試劑盒,價(jià)格實(shí)惠,質(zhì)量保證,價(jià)格請(qǐng)咨詢?cè)诰€人員。
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細(xì)胞色素C(Cyt-C)ELISA 試劑盒
酶聯(lián)免疫吸附測(cè)定enzyme linked immunosorbent assay(簡(jiǎn)寫ELISA)指將可溶性的抗原或抗體結(jié)合到聚苯乙烯等固相載體上,利用抗原抗體結(jié)合專一性進(jìn)行免疫反應(yīng)的定性和定量檢測(cè)方法。酶聯(lián)免疫吸附測(cè)定(ELISA)為免疫學(xué)中的經(jīng)典實(shí)驗(yàn),本詞條從定義、基本原理、分類方法、操作要點(diǎn)等方面對(duì)其進(jìn)行了詳細(xì)介紹。
酶與抗體交聯(lián),常用戊二醛法和過(guò)碘酸鹽氧化法。郭春祥建立的HRP標(biāo)記抗體的改良過(guò)碘酸鈉法簡(jiǎn)單易行,標(biāo)記效果好,特別適用于實(shí)驗(yàn)室的小批量制備。其標(biāo)記程序?yàn)椋簩?μg HRP溶于0.5ml蒸餾水中,加入新鮮配制的0.06 mol/L的過(guò)碘酸鈉(NaIO4)水溶液0.5ml,混勻置4℃冰箱30分鐘 , 取出加入0.16mol/L的乙二醇水溶液0.5ml,室溫放置30分鐘后加入含5(g純化抗體的水溶液1ml,混勻并裝透析袋,以0.05mol/L、pH9.5的碳酸鹽緩沖液于4℃冰箱中慢慢攪拌透析6小時(shí)(或過(guò)夜)使之結(jié)合,然后吸出,加硼氫化鈉(NaBH4)溶液( 5(g/ml)0.2ml,置4℃冰箱2小時(shí),將上述結(jié)合物混合液加入等體積飽和硫酸銨溶液,置4℃冰箱30分鐘后離心,將所得沉淀物溶于少許0.02mol/L、pH7.4PBS中,并對(duì)之透析過(guò)夜(4℃),次日離心除去不溶物,即得到酶標(biāo)抗體,用0.02mol/L、pH7.4PBS稀至5ml,進(jìn)行測(cè)定后,冷凍干燥或低溫保存。
細(xì)胞色素C(Cyt-C)ELISA 試劑盒
工作原理
本試劑盒采用雙位點(diǎn)夾心酶聯(lián)免疫吸附法(ELISA),測(cè)定樣品中的水平。向預(yù)先包被抗體的酶標(biāo)孔中加入標(biāo)準(zhǔn)品、待測(cè)樣本和HRP標(biāo)記的抗體,經(jīng)過(guò)溫育和洗滌,去除未結(jié)合的組分,然后再加入底物A、B,產(chǎn)生藍(lán)色,并在酸的作用下轉(zhuǎn)化成終的黃色。顏色的深淺與樣品中的濃度呈正相關(guān)。
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