PCR儀的特點(diǎn)是靈敏度高,污染是實(shí)驗(yàn)中常見的問題,只要實(shí)驗(yàn)室曾經(jīng)擴(kuò)增過某個(gè)片段,就有可能以后的實(shí)驗(yàn)中發(fā)生污染。所以,我們?cè)趯?shí)驗(yàn)前,可以用紫外燈破壞污染物。簡(jiǎn)便快速,一次性加好反應(yīng),對(duì)標(biāo)本的純度要求低。
PCR儀的反應(yīng)成分有模板濃度多高會(huì)導(dǎo)致反應(yīng)的非特異行增加,不能混合其他的物質(zhì)。引物濃度過高會(huì)導(dǎo)致模板與引物配錯(cuò),反應(yīng)特性下降。使用酶量增加使反應(yīng)特異性下降,如果太少,有影響產(chǎn)量。我們?cè)谠囼?yàn)中,會(huì)使用高特異行的酶,測(cè)試會(huì)比較。
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